Po znieczuleniu Nembutalem (Abbott Laboratories, North Chicago, Illinois, USA) tętnicę szyjną podwiązano w pobliżu rozwidlenia tętnic szyjnych, jak opisali Kumar i Lindner (20). W badaniu pompy, białko MK w roztworze soli (0,8 mg / ml) (n = 10), albumina ludzka (Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Japonia) w roztworze soli (0,8 mg / ml) (n = 10) lub sól fizjologiczna ( n = 10) wlewano za pomocą pompy osmotycznej (Alza Corporation, Palo Alto, California, USA) myszom z niedoborem MK. Pompy napełniały w sumie 90. L w sposób ciągły przez okres 7 dni. Pompki wszczepiono pod skórę brzucha i wymieniono 7 dni p...
Dane są nanoszone w skali logarytmicznej w celu wyróżnienia poszczególnych kinetycznych składników odzyskiwania. Odzyskiwanie frakcyjne oceniono jako stosunek piku INa podczas drugiego, w stosunku do pierwszego, impulsu (P2 / P1) i znormalizowano do punktu danych 1000 milisekund, aby wyeliminować różnice w bloku tonikowym przy ~ 80 mV (na Figurze 3b). Średnie dane dopasowano do funkcji biexponential y = A1 (1 A e / t / a 1) + A2 (1 A e / t / a 2), gdzie A1, A są stałą amplitudy i czasu znacznika, składnik szybkiego odzyskiwania i A2, P2 odzwierciedlają mniejszy składnik o powolnym odzyskiwaniu. Dopasowane...
Neutrofilowa oksydaza NADPH odgrywa kluczową rolę w obronie gospodarza i w stanach zapalnych poprzez uwalnianie dużych ilości ponadtlenku i innych ROS. Prozapalne cytokiny, takie jak GM-CSF i TNF-a prime produkcja ROS przez neutrofile poprzez nieznane mechanizmy. Tutaj wykorzystaliśmy sekwencjonowanie peptydów za pomocą tandemowej spektrometrii masowej, aby pokazać, że GM-CSF i TNF-a indukują fosforylację Ser345 na p47phox, cytosolowy składnik oksydazy NADPH, w ludzkich neutrofilach. Ponieważ Ser345 znajduje się w sekwencji konsensusowej MAPK, przetestowaliśmy działanie inhibitorów MAPK. Inhibitory szlak...
