szajnochy przychodnia warszawa

Prądy Na całej komórce w oocytach Xenopus depolaryzowanych od> 100 do> 20 mV w obecności (linia przerywana) i nieobecności (linia ciągła) 200. M lidokainy. W przypadku zarówno typu dzikiego (prawy panel) i R1623Q (lewy panel) wyświetlane są sparowane obserwacje z pojedynczego oocytu. (b) Podsumowane. 50 danych przed ekspozycją (otwarte słupki) i po (pełnych słupkach) na 200. M lidokainy. Y50 reprezentuje czas (ms) od piku INa do zaniku 50% (kontrola R1623Q, n = 17, R1623Q 200 pM lidokainy, n = 14, kontrola typu dzikiego, n = 9, lidokaina 200. M typu dzikiego, n = 9). W przypadku R1623Q, <50 było znacznie zmniejszone przez lidokainę (AP <0,01). (c) Podsumowanie sparowanych danych porównujących frakcyjne zmniejszenie piku INa w obecności wobec nieobecności 200. M lidokainy dla oocytów eksprymujących R1623Q (lewy słupek, n = 14) lub typu dzikiego (prawy słupek, n = 9) . Supresja lidokainy dla piku INa była większa dla R1623Q (AP <0,05). Wpływ lidokainy na obecność całych komórek R1623Q w komórkach HEK-293. Figura 2a pokazuje typ dziki (lewy) i R1623Q (prawy) INa pod nieobecność (góra) i obecność (na dole) 200. M lidokainy. Zgodnie z danymi z całego oocytów, fenotyp R1623Q w hodowanych komórkach obejmował spowolnione tempo rozpadu INa. Ponadto lidokaina miała niewielki wpływ na rozpad INA typu dzikiego, ale znacznie przyspieszyła rozpad R1623Q INa. Figura 2b określa ilościowo wpływ lidokainy na rozpad INa (y50) na zakres potencjałów błony. Co ciekawe, stopień, w jakim lidokaina przyspiesza tempo zaniku, była względnie niezależna od napięcia (zmiana średniej. 50 wynosiła 38% przy ~ 30 mV w porównaniu z 33% przy +20 mV), pomimo znacznej zależności napięciowej od szybkości zaniku INa. . Przy bardziej fizjologicznie istotnym stężeniu lidokainy (20 | jM), R1623Qa50 przy ~ 20 mV było nadal zmniejszone do 2,7. 0,8 milisekundy (n = 7, nie pokazano) w porównaniu z kontrolą (4,5. 0,2 milisekundy, n = 18, P <0,001). Figura 2 Działanie lidokainy na prądy R1623Q wyrażane w komórkach HEK. (a) Rodzina prądów Na pochodziła z komórek trwale eksprymujących typu dzikiego (WT: lewe panele) lub R1623Q (prawe panele) w nieobecności (na górze) lub obecności (na dole) 200. M lidokainy. Zastosowany protokół napięcia jest pokazany w wypustce; przedział regeneracji 20 sekund przy ~ 100 mV wstawiono pomiędzy kolejne depolaryzacji etapów dla wszystkich eksperymentów. (b) Czas rozpadu (~ 50) od szczytu wewnętrznego INa do 50% zaniku. Jak pokazano, 200. M lidokainy przyspieszyło czasy zaniku dla wszystkich napięć testowanych dla obu WT (zamknięte kółka, n = 10) i R1623Q (wypełnione kwadraty, n = 14) w porównaniu z warunkami bez leku dla WT (otwarte kółka, n = 19) i R1623Q (otwarte kwadraty, n = 18). Zaskakujący brak zależności napięciowej w efekcie blokującym na rysunku 2b skłonił nas do spekulacji, że lidokaina wpływa na rozpad prądu R1623Q poprzez mechanizm odmienny od bloku w stanie otwartym. Sercowy kanał Na jest niepełny w typowym. Odpoczynku. potencjały membranowe (~ 100 mV do ~ 90 mV) ze względu na znaczny stopień dezaktywacji ze stanów zamkniętych (przed otwarciem) (32). Zastanawialiśmy się, czy dezaktywacja w stanie zamkniętym jest wzmacniana przez mutację R1623Q, a jeśli tak, czy to zmienione zachowanie bramkowania jest podstawą zwiększonej wrażliwości lidokainy na zmutowany kanał. Zależną od napięcia dostępność kanałów typu dzikiego i R1623Q zbadano w zakresie potencjałów błonowych ujemnych do progu otwarcia kanału (Figura 3, wstawka). Figura 3a przedstawia pik INa wykreślony jako funkcja napięcia kondycjonującego (znormalizowanego do pomiaru. 120 mV). Pełne krzywe reprezentują nieliniowe dopasowanie najmniejszych kwadratów funkcji Boltzmanna do danych (patrz legenda z rysunku 3). R1623Q V1 / 2 przesunięto w lewo w stosunku do typu dzikiego (<70,0. 2,2 mV w porównaniu z> 62,8. 1,2 mV, P = 0,0071), a współczynnik nachylenia również został zwiększony (7,96. 0,6 vs
[podobne: wodniak powrózka nasiennego, badanie trus, badanie żywej kropli krwi wrocław ]