trzustka schemat

Podobne wyniki uzyskano w 5 niezależnych eksperymentach. (b) Aktywacja NF-kB. Transdukowane komórki wstępnie traktowano nośnikiem lub 50 ng / ml ligandu RANK (RANKL) przez 30 minut. Ekstrakt jądrowy został przygotowany i przeanalizowany przez EMSA za pomocą sondy oligonukleotydowej NF-kB, jak opisano w Methods. Wyniki były podobne w 3 niezależnych eksperymentach. Ścieżka 1: Komórki transdukowane EV. Ścieżka 2: Komórki transdukowane EV, z 50-krotną nadmiarową nieznakowaną sondą dodaną jako konkurent. Ścieżka 3: Komórki transdukowane EV i traktowane ligandem RANK. Ścieżka 4: Komórki transdukowane za pomocą EV i traktowane ligandem RANK i 50-krotną nadmiarową nieznakowaną sondą dodaną jako konkurent. Ścieżka 5: Komórki transdukowane MVNP. Ścieżka 6: Komórki transdukowane MVNP, z 50-krotną nadmiarową nieznakowaną sondą dodaną jako konkurent. Ścieżka 7: Komórki transdukowane MVNP i traktowane ligandem RANK. Ścieżka 8: Komórki transdukowano MVNP i traktowano ligandem RANK i 50-krotną nadmiarową nieznakowaną sondą dodaną jako konkurent. Ścieżka 9: Komórki transdukowane MVM. Ścieżka 10: Komórki transdukowane MVM, z 50-krotną nadmiarową nieznakowaną sondą dodaną jako konkurent. Ścieżka 11: Komórki transdukowane MVM i traktowane ligandem RANK. Ścieżka 12: Komórki transdukowane MVM, traktowane ligandem RANK i 50-krotną nadmiarową nieznakowaną sondą dodaną jako konkurent. IL-6 wykryto w pożywce kondycjonowanej komórkami MVNP w hodowlach pozbawionych 1,25 (OH) 2D3, ale wykryto w pożywce kondycjonowanej komórkami MVM po 7 dniach hodowli tylko wtedy, gdy potraktowano je 1,25 – (OH) 2D3. Komórki transdukowane z EV nie uwalniały IL-6 do kondycjonowanej pożywki w znaczących ilościach (tabela 2). Po 14 dniach hodowli, transdukowane komórki MVNP i MVM uwalniały IL-6 w hodowlach bez 1,25 (OH) 2D3. Tabela 2 Efekty 1,25- (OH) 2D3 na IL-6 uwalniane do kondycjonowanych pożywek z hodowli transdukowanych szpiku kostnego Aktywacja NF-kB przez RANK. Następnie określiliśmy, czy zwiększona ekspresja RANK przez komórki transdukowane MVNP w nieobecności ligandu RANK skutkowała większą aktywacją NF-kB niż ta wynikająca ze zwiększonej ekspresji RANK przez transdukowane komórki MVM. Zwiększona ekspresja RANK w transdukowanych komórkach MVNP aktywowała NF-kB do podobnych poziomów w nieobecności ligandu RANK i gdy była wstępnie stymulowana ligandem RANK przez 30 minut (Figura 4b, ścieżki 5 i 7). W przeciwieństwie do tego, dodanie liganda RANK było wymagane do aktywacji NF-kB w komórkach transdukowanych EV (Figura 4b, ścieżki i 3). Transdukowane komórki MVM wyrażały niższe poziomy NF-kB niż transdukowane komórki MVNP w nieobecności ligandu RANK; dodanie liganda RANK zwiększyło aktywację NF-kB 2- do 3-krotnie (Figura 4b, ścieżki 9 i 11). Dyskusja OCLs od osób z chorobą Pageta zawierają inkluzje jądrową i cytoplazmatyczną, o których doniesiono, że reagują krzyżowo z przeciwciałami przeciwko nukleokapsydom z paramyksowirusów, w tym z MV, syncytialnego wirusa oddechowego i psiego wirusa zapłodnienia (4. 8). Nasze poprzednie badania sugerowały, że MV jest najczęstszym wirusem wykrywalnym u pacjentów, których badaliśmy. Jednak nie ustalono, czy te wtrącenia reprezentują przewlekłe paramyksowirusowe zakażenie komórek w linii OCL, czy też te geny wirusowe mają jakąkolwiek patologiczną rolę w chorobie Pageta. Nasze dane sugerują, że OCL utworzone przez normalne prekursory OCL, które eksprymują gen MVNP, mają wiele cech OCLs od pacjentów z chorobą Pageta. W porównaniu z OCL z nietransdukowanych komórek, OCL utworzone z normalnych prekursorów OCL transdukowanych genem MVNP mają zwiększoną liczbę jąder na wielojądrzastą komórkę, zwiększoną wrażliwość na 1,25- (OH) 2D3, zwiększoną zdolność resorpcji kości, zwiększoną produkcję IL-6 , zwiększoną ekspresję RANK i wykazują zwiększone tworzenie OCL
[podobne: olej rydzowy właściwości, występowanie grzybów, złamanie collesa ]