Tworzenie neointimy w modelu restenozy jest tłumione u myszy z niedoborem midkiny

Tworzenie neointimy jest częstą cechą miażdżycy i restenozy po angioplastyce balonowej. Aby znaleźć nowy cel w celu powstrzymania powstawania neointimy, zbadaliśmy możliwą rolę midkiny (MK), wiążącego heparynę czynnika wzrostu z czynnościami neurotroficznymi i chemotaktycznymi, w powstawaniu neointimy. Ekspresja MK wzrastała podczas tworzenia neointimy spowodowanej przez śródmiąższowe uszkodzenie balonu tętnicy szyjnej szczura. Tworzenie neointimy w modelu restenozy było silnie hamowane u myszy z niedoborem MK. Ciągłe podawanie białka MK myszom z niedoborem MK przywróciło tworzenie nowych naczyń. Rekrutacja leukocytów do ścian naczyń po urazie była znacząco zmniejszona u myszy z niedoborem MK. Rozpuszczalny MK, jak również związany z podłożem, wywołanym migracją makrofagów in vitro. Wyniki te wskazują, że MK odgrywa kluczową rolę w powstawaniu nowej błony wewnętrznej, co najmniej częściowo, ze względu na jej zdolność do pośredniczenia w rekrutacji leukocytów. Wprowadzenie Złożone procesy prowadzące do miażdżycy i restenozy postangioplastycznej są coraz wyraźniejsze (1, 2). Wspólną cechą tych patologicznych procesów naczyniowych jest powstawanie zmian w obrębie błony wewnętrznej. Odpowiadając na sygnały dostarczane z uszkodzonych komórek śródbłonka i gromadzących się komórek zapalnych, komórki mięśni gładkich migrują z ośrodka do wnętrza i rozmnażają się, tworząc zgrubienia. Tłumienie tworzenia zmian w obrębie błony wewnętrznej jest ważne z punktu widzenia zapobiegania restenozie i miażdżycy. Do klinicznego zastosowania obiecujące jest hamowanie czynnika wzrostu (3-7), a PDGF stało się jednym z takich podejść (3, 4). Wybór czynnika wzrostu jako celu jest ważny, tak aby uzyskać dobry efekt terapeutyczny. Uważaliśmy, że wybrany czynnik wzrostu powinien korzystnie mieć następujące właściwości: (a) jest niezbędny do tworzenia się błony wewnętrznej, mianowicie restenoza jest tłumiona u myszy z niedoborem tego czynnika; (b) jego dystrybucja jest ograniczona; i (c) jego poziom ekspresji wzrasta podczas tworzenia się błony wewnętrznej. Tutaj donoszemy, że czynnik wzrostu wiążący heparynę, midkina (MK) (8, 9), spełnia te wymagania. MK ma 50% identyczności sekwencji z cząsteczką wiążącą wzrost związany z pleiotrofiną / heparyną (PTN / HB-GAM) i różni się od czynników wzrostu fibroblastów (10. 12). Ekspresja MK w dorosłej tkance jest poważnie ograniczona, a u myszy tylko nerka i macica eksprymują tę cząsteczkę na wysokich poziomach (13). Zarówno MK, jak i PTN / HB-GAM mają aktywność neurotroficzną i są uważane za zaangażowane w neurogenezę i progresję nowotworu (14-17). Metody Modele szczurów. Samce szczurów Sprague-Dawley (15-20 tygodni, 350-400 g), którym karmiono normalną karmę dla gryzoni, znieczulano ketaminą (45 mg / kg). Szkodliwe uszkodzenie balonu wewnątrz światła w tętnicy szyjnej przeprowadzono sposobem opisanym przez Clowes i in. (18). Trzy (n = 3), 7 (n = 4) i 14 dni (n = 3) po urazie balonu, pobrano tętnice szyjne do analizy histologicznej. Do analizy RT-PCR i analizy Western blotting, próbki 3 godziny (n = 3), 3 (n = 3), 7 (n = 3) i 14 dni (n = 3) po uszkodzeniu balonu i kontroli (n = 3) tętnicy szyjnej tętnice zostały wycięte i starannie oczyszczone z otaczającej tkanki. Tkankę natychmiast homogenizowano w celu izolacji całkowitego RNA lub białka, jak opisano wcześniej (19). Modele myszy. Myszy z niedoborem MK zostały wygenerowane w sposób opisany szczegółowo w innym miejscu (15). Myszy karmiono normalną karmą dla gryzoni. W celu monitorowania powstawania zmian w obrębie błony wewnętrznej, dorosłe myszy 129-SV i myszy z niedoborem MK z genem 129-SV zastosowano w modelu ligacji szyjnej (10-15 tygodni, 25-30 g). Wiek zmutowanych myszy i myszy kontrolnych był identyczny
[podobne: turkuć podjadek ciekawostki, babka płesznik dawkowanie, wodniak powrózka nasiennego ]