Upośledzona ekspresja receptora trombopoetyny przez płytki krwi od pacjentów z czerwienicą prawdziwą ad 6

Analiza densytometryczna ekspresji Mpl przez płytki krwi od 10 pacjentów z czerwienią prawdziwą i 2 pacjentów z idiopatyczną zwłóknieniem szpiku. Nieprawidłowości, które znaleźliśmy w fosforylacji tyrozyny białek płytek krwi u pacjentów z czerwienicą prawdziwą mogą odzwierciedlać nieprawidłowości w kinazach Janus lub Mpl. Ponieważ ilość i elektroforetyczna ruchliwość JAK2 (i Tyk2) wydawały się być normalne w tych płytkach, zbadaliśmy ekspresję płytek Mpl przy użyciu immunoblottingu. Jak pokazano na Fig. 3A i w Tabeli 2, dla równych ilości białka lizatu płytek, ekspresja receptora trombopoetyny była znacznie zmniejszona w płytkach od pacjentów z czerwienicą prawdziwą w porównaniu z płytkami od zdrowych osobników. Analiza cytometrii przepływowej świeżych, nieutrwalonych płytek krwi dała zgodne wyniki, co wskazuje, że wynik z immunoblottingiem nie był spowodowany manipulacją płytkami krwi (Figura 3B). Aby upewnić się, że upośledzona ekspresja Mpl przez płytki krwi od pacjentów z czerwienicą prawdziwą nie była konsekwencją proteolizy podczas izolacji płytek krwi lub regulacji w dół za pomocą trombopoetyny lub jeszcze nieokreślonych czynników w osoczu pacjentów, zbadaliśmy ekspresję Mpl w lizatach otrzymanych z mieszaniny równych ilości płytek krwi od zdrowych osobników i pacjentów z czerwienicą prawdziwą, po inkubacji normalnych płytek krwi w osoczu od pacjentów z czerwienicą prawdziwą lub po długotrwałej ekspozycji na prawidłowe płytki krwi do wysycającego stężenia trombopoetyny. W żadnym przypadku ekspresja Mpl nie pogorszyła się w prawidłowych płytkach krwi (dane nie pokazane).
Zmniejszona ekspresja Mpl płytek krwi jako markera dla czerwienicy prawdziwej i idiopatycznej zwłóknienia szpiku
Aby ocenić swoistość tych obserwacji, zbadaliśmy ekspresję Mpl na płytkach od 34 pacjentów z czerwienicą prawdziwą, 14 pacjentów z idiopatyczną mielofibrozą, 9 pacjentów z niezbędną trombocytozą, 7 pacjentów z przewlekłą białaczką szpikową, 14 pacjentów z wtórną lub niezdefiniowaną erytrocytozą, 8 pacjentów z hemochromatozą, poddawanych okresowym upuszczeniom terapeutycznym, 2 pacjentom z niepowikłanym niedoborem żelaza i 10 pacjentom z prawidłową czynnością. Ekspresja Mpl była zmniejszona w płytkach krwi wszystkich 34 pacjentów z czerwienicą prawdziwą, podczas gdy ekspresja Mpl nie była zmniejszona w płytkach krwi od pacjentów z istotną trombocytozą, przewlekłą białaczką szpikową, erytrocytozą, hemochromatozą lub niedoborem żelaza lub u zdrowych osób. Nie stwierdzono korelacji między zmniejszoną ekspresją Mpl u pacjentów z czerwienicą prawdziwą a liczbą płytek, poziomem hemoglobiny, liczbą leukocytów, czasem trwania choroby, obecnością lub rozmiarem śledziony, obecnością niedoboru żelaza, stosowaniem kwasu acetylosalicylowego lub jednoczesnym stosowaniem hydroksymocznik lub terapia interferonem alfa (dane nie pokazane). Co ciekawe, ekspresja płytek Mpl również zmniejszyła się u 13 z 14 pacjentów z idiopatyczną mielofibrozą. Zgodność na obniżoną indukowaną trombopoietiną fosforylację tyrozyny białek i obniżoną ekspresję Mpl wynosiła 100 procent u 18 pacjentów (16 z czerwienicą prawdziwą i 2 z idiopatyczną mielofibrozą) z wystarczającą liczbą płytek krwi dla obu testów.
Ekspresja Mpl przez megakariocyty
Rysunek 4
[patrz też: bromazepam, disulfiram, belimumab ]
[podobne: aktualne występowanie grzybów, ból pod lewą łopatką przyczyny, olej rydzowy właściwości ]